សេចក្តីផ្តើម

នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ជីវវេជ្ជសាស្ត្រ និងគីមីទំនើបៗ ប.បំពង់​វប្បធម៌​ដែល​អាច​ចោល​បាន​ត្រូវ​បាន​គេ​ប្រើប្រាស់​យ៉ាង​ទូលំទូលាយ​ក្នុង​ការ​ដាំដុះ​កោសិកា ប្រតិកម្ម​គីមី ការ​អភិរក្ស​គំរូ និង​ប្រតិបត្តិការ​សំខាន់ៗ​ផ្សេង​ទៀត។សារៈសំខាន់របស់ពួកវានៅក្នុងដំណើរការពិសោធន៍មិនអាចមើលរំលងបានទេ។ ដោយសារបំពង់វប្បធម៌ទាំងនេះមានទំនាក់ទំនងដោយផ្ទាល់ជាមួយសំណាកពិសោធន៍ សម្ភារៈ ទំហំ ការបិទ និងសូម្បីតែថាតើវាត្រូវបានក្រៀវឬអត់ នឹងមានផលប៉ះពាល់យ៉ាងសំខាន់ទៅលើលទ្ធផលពិសោធន៍។ ការជ្រើសរើសមិនត្រឹមត្រូវអាចនាំឱ្យមានការចម្លងមេរោគ ការបាត់បង់សំណាក ឬភាពលំអៀងនៃទិន្នន័យពិសោធន៍ ដោយហេតុនេះប៉ះពាល់ដល់ភាពត្រឹមត្រូវ និងភាពអាចផលិតឡើងវិញបាននៃការសិក្សា។

ប្រភេទសំខាន់ៗនៃបំពង់វប្បធម៌ដែលអាចចោលបាន

មានបំពង់​វប្បធម៌​ដែល​អាច​ប្រើ​ចោល​បាន​ច្រើន​ប្រភេទ ហើយ​អ្នកស្រាវជ្រាវ​ត្រូវ​ជ្រើសរើស​ប្រភេទ​ត្រឹមត្រូវ​ទៅតាម​គោលបំណង​នៃ​ការពិសោធន៍ បរិយាកាស​ប្រតិបត្តិការ និង​លក្ខណៈ​នៃ​គំរូ។ ពួកវា​ត្រូវបាន​ចាត់ថ្នាក់​ជា​បី​ទិដ្ឋភាព​ដូចខាងក្រោម៖ សម្ភារៈ សមត្ថភាព និង​មុខងារ​ពិសេស៖

១. ចំណាត់ថ្នាក់តាមសម្ភារៈ

បំពង់វប្បធម៌ដែលអាចចោលបានដែលធ្វើពីវត្ថុធាតុផ្សេងៗគ្នាមានភាពធន់នឹងសីតុណ្ហភាព ស្ថេរភាពគីមី និងលក្ខណៈសម្បត្តិអុបទិកខុសៗគ្នា៖

• ប៉ូលីប្រូភីលីនអ៊ី: ធន់នឹងសីតុណ្ហភាពខ្ពស់ និងការច្រេះគីមីល្អ សមរម្យសម្រាប់ការដាំដុះកោសិកាជាប្រចាំ ការពិសោធន៍ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល និងកម្មវិធីផ្សេងៗទៀត។
• ប៉ូលីស្ទីរ៉ែន: តម្លាភាពខ្ពស់ ងាយស្រួលក្នុងការសង្កេតមើលស្ថានភាពរាវ និងកោសិកា ដែលត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅក្នុងការធ្វើតេស្តអុបទិក ប៉ុន្តែមិនធន់នឹងសីតុណ្ហភាពខ្ពស់ទេ ជាធម្មតាមិនអាចប្រើសម្រាប់ autoclaving បានទេ។
• បំពង់វប្បធម៌កញ្ចក់ទោះបីជាអាចប្រើឡើងវិញបាន និងមានស្ថេរភាពខាងគីមីក៏ដោយ ក៏វាមានតម្លៃថ្លៃ តម្រូវឱ្យមាននីតិវិធីសម្អាត និងសម្លាប់មេរោគបន្ថែម និងអាចបង្កហានិភ័យនៃការចម្លងមេរោគឆ្លង។

2. ចំណាត់ថ្នាក់តាមសមត្ថភាព

អាស្រ័យលើបរិមាណសំណាកដែលត្រូវការសម្រាប់ការពិសោធន៍ សមត្ថភាពនៃបំពង់ដាំដុះមានចាប់ពីបរិមាណតិចតួចរហូតដល់បរិមាណច្រើន៖

• បំពង់មីក្រូសេនទ្រីហ្វុយហ្ស៊ីស៖ ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការចែកចាយសំណាក ទឹកភ្លៀងដោយម៉ាស៊ីន centrifugal ការស្រង់ចេញ DNA/RNA និងប្រតិបត្តិការផ្សេងៗទៀត។
• បំពង់វប្បធម៌ស្តង់ដារសមត្ថភាពដែលប្រើជាទូទៅបំផុតនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ សមស្របសម្រាប់ការដាំដុះកោសិកា ប្រតិកម្មលាយ ការអភិរក្សគំរូ និងគោលបំណងផ្សេងៗទៀត។
• បំពង់ដាំដុះដែលមានសមត្ថភាពធំ: ស័ក្តិសមសម្រាប់ការដាំដុះកោសិកាទ្រង់ទ្រាយធំ ឬដំណើរការដំណោះស្រាយក្នុងបរិមាណច្រើន។

៣. ការចាត់ថ្នាក់តាមមុខងារពិសេស

បំពង់ទាំងនេះមានជាមួយនឹងលក្ខណៈពិសេសបន្ថែមជាច្រើនដើម្បីបំពេញតម្រូវការពិសោធន៍ជាក់លាក់៖

• បំពង់​ដែល​បាន​សម្លាប់​មេរោគ​រួច​ជា​ស្រេច​ដោយ​គ្មាន​មេរោគ: សម្លាប់មេរោគដោយរោងចក្រដោយវិទ្យុសកម្មហ្គាម៉ា ឬអូតូក្លាវី សមស្របសម្រាប់ការពិសោធន៍ដែលមានតម្រូវការអាសេបទិកខ្ពស់។
• ជាមួយគម្របប្រអប់ព្រីនធឺរ៖ អនុញ្ញាតឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរឧស្ម័ន សមស្របសម្រាប់អតិសុខុមប្រាណ ឬខ្សែកោសិកាដែលត្រូវការខ្យល់ចេញចូល និងការពារការចម្លងរោគពីប្រភពខាងក្រៅ។
• បំពង់ធន់នឹងសីតុណ្ហភាពទាប: អាចប្រើប្រាស់បានដោយសុវត្ថិភាពក្នុង -80 ℃ ឬសូម្បីតែបរិស្ថានអាសូតរាវ សមស្របសម្រាប់ការអភិរក្សសីតុណ្ហភាពទាបរយៈពេលវែងនៃគំរូជីវសាស្រ្ត។
• បំពង់ដែលមានកម្រិត/មិនមានកម្រិតបំពង់​ដែល​មាន​កម្រិត​វាស់​វែង​ងាយស្រួល​សម្រាប់​ការ​ប៉ាន់ស្មាន​រហ័ស និង​ការ​ចែកចាយ​បរិមាណ​រាវ ដើម្បី​បង្កើន​ប្រសិទ្ធភាព​នៃ​ការ​ពិសោធន៍។

កត្តាសំខាន់ៗក្នុងការជ្រើសរើសបំពង់វប្បធម៌

នៅក្នុងដំណើរការនៃការរចនា និងប្រតិបត្តិការពិសោធន៍ ការជ្រើសរើសបំពង់វប្បធម៌ដែលអាចចោលបានសមស្រប គឺមានសារៈសំខាន់ណាស់ ដើម្បីធានាបាននូវប្រសិទ្ធភាពពិសោធន៍ និងភាពត្រឹមត្រូវនៃលទ្ធផល។ អ្នកស្រាវជ្រាវគួរតែពិចារណាយ៉ាងទូលំទូលាយអំពីកត្តាសំខាន់ៗមួយចំនួន៖

១. ប្រភេទនៃការពិសោធន៍

តម្រូវការសម្រាប់បំពង់ដាំដុះមានភាពខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងពីការពិសោធន៍មួយទៅការពិសោធន៍មួយទៀត ហើយគួរតែត្រូវបានជ្រើសរើសទៅតាមខ្លឹមសារនៃប្រតិបត្តិការ និងបរិយាកាសពិសោធន៍៖

• សម្រាប់ការដាំដុះកោសិកា: តម្រូវការសម្រាប់ភាពគ្មានមេរោគគឺខ្ពស់ខ្លាំងណាស់ ហើយការប្រើប្រាស់បំពង់មាប់មគដែលបានសម្លាប់មេរោគជាមុនជាមួយនឹងគម្របប្រអប់ព្រីនធឺរដែលអាចដកដង្ហើមបាន ដើម្បីធានាបាននូវការផ្លាស់ប្តូរឧស្ម័នត្រូវបានណែនាំ។
• ការពិសោធន៍ PCR / ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល: ត្រូវតែគ្មានអង់ស៊ីម DNA អង់ស៊ីម RNA និងបំពង់ដែលគ្មានសារធាតុ pyrogen ជាញឹកញាប់ប្រើបំពង់ polypropylene ថ្នាក់ស្អាត។
• ការផ្ទុកនៅសីតុណ្ហភាពទាប: បំពង់ដែលមានភាពធន់នឹងសីតុណ្ហភាពទាបល្អគួរតែត្រូវបានប្រើដើម្បីជៀសវាងការបំបែកនៅសីតុណ្ហភាពទាប។

២. លក្ខណៈ​គំរូ

លក្ខណៈសម្បត្តិរូបវិទ្យា-គីមីនៃសំណាកមានឥទ្ធិពលដោយផ្ទាល់ទៅលើជម្រើសនៃសម្ភារៈ និងការកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធមុខងារនៃបំពង់វប្បធម៌៖

• គំរូរាវ ឬរឹង: កំណត់បរិមាណដែលត្រូវការ និងរូបរាងនៃរន្ធបំពង់។
• គំរូអាស៊ីត ឬអាល់កាឡាំងសំណាក​ដែល​មាន​ជាតិ​กัดกร่อน​ខ្ពស់​ត្រូវការ​សម្ភារៈ​ដែល​ធន់​នឹង​គីមី ដើម្បី​ជៀសវាង​ការ​ខូច​ទ្រង់ទ្រាយ​បំពង់ ឬ​ការ​បំពុល។
• ថាតើត្រូវជៀសវាងពន្លឺឬអត់សំណាក​ដែល​ងាយ​នឹង​ប្រតិកម្ម​នឹង​ពន្លឺ​គួរ​ជ្រើសរើស​បំពង់​វប្បធម៌​សម្ភារៈ​ពណ៌​លឿង​ខ្ចី ឬ​ស្រអាប់ ដើម្បី​ការពារ​ការ​រលួយ​ដោយ​ពន្លឺ។

៣. តម្រូវការសម្រាប់ការក្រៀវ

តម្រូវការសម្រាប់ការក្រៀវ និងប្រភេទនៃការក្រៀវដែលប្រើ គឺជាការពិចារណាសំខាន់ៗក្នុងការជ្រើសរើសបំពង់៖

• ការក្រៀវមុនពេលសម្លាប់មេរោគ ទល់នឹង ការក្រៀវដោយខ្លួនឯង: ផលិតផលដែលបានសម្លាប់មេរោគជាមុនពីរោងចក្រគឺសមរម្យសម្រាប់ការពិសោធន៍ដែលមានទិន្នផលខ្ពស់ ដែលជួយសន្សំសំចៃពេលវេលា។ ប្រសិនបើមន្ទីរពិសោធន៍មានឧបករណ៍សម្លាប់មេរោគដោយម៉ាស៊ីនអូតូក្លេវ អ្នកអាចជ្រើសរើសបំពង់ PP ដែលអាចសម្លាប់មេរោគបានដោយម៉ាស៊ីនអូតូក្លេវ។
• ភាពឆបគ្នានៃការក្រៀវឧទាហរណ៍ សម្ភារៈ PS មិនស័ក្តិសមសម្រាប់ការសម្លាប់មេរោគដោយម៉ាស៊ីនស្វ័យប្រវត្តិទេ ហើយវាសម្រាប់តែការប្រើប្រាស់តែម្តងប៉ុណ្ណោះ។

៤. ភាពឆបគ្នា

បំពង់គួរតែត្រូវបានសម្របខ្លួនបានល្អទៅនឹងឧបករណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ ដើម្បីធានាបាននូវប្រតិបត្តិការរលូន និងលទ្ធផលដែលអាចទុកចិត្តបាន៖

• ភាពឆបគ្នានៃកម្លាំងបង្វិលជុំបំពង់ដែលប្រើសម្រាប់ម៉ាស៊ីន centrifugation ត្រូវមានរចនាសម្ព័ន្ធរឹងមាំដើម្បីទប់ទល់នឹងកម្លាំង centrifugal នៅល្បឿនបង្វិលខ្ពស់។
• ភាពឆបគ្នានៃស្វ័យប្រវត្តិកម្មសម្រាប់ការពិសោធន៍ដែលតម្រូវឱ្យប្រើប្រាស់មនុស្សយន្តបំពង់បឺត ប្រព័ន្ធចែកចាយដោយស្វ័យប្រវត្តិ ជាដើម ត្រូវតែប្រើទំហំបំពង់ស្តង់ដារ។

៥. ថ្លៃដើម និងនិរន្តរភាព

ការគ្រប់គ្រងដោយសមហេតុផលនៃការចំណាយ និងការប្រើប្រាស់ធនធានក៏ជាការពិចារណាដ៏សំខាន់មួយក្នុងការបំពេញតម្រូវការពិសោធន៍ផងដែរ៖

• បោះចោលទល់នឹងអាចប្រើឡើងវិញបាន: បំពង់​ចោល​បាន​ងាយ​ស្រួល​គ្រប់គ្រង និង​ជៀសវាង​ការ​ចម្លង​រោគ សមរម្យ​សម្រាប់​ការ​ពិសោធន៍​ដែល​មាន​ប្រសិទ្ធភាព​ខ្ពស់​។ បំពង់​កញ្ចក់​ដែល​អាច​ប្រើ​ឡើងវិញ​បាន​គឺ​សមរម្យ​សម្រាប់​ការ​ពិសោធន៍​មូលដ្ឋាន​ដែល​មាន​ថវិកា​មាន​កំណត់​។
• មាត្រដ្ឋានទិញការទិញបរិមាណច្រើនអាចកាត់បន្ថយតម្លៃឯកតា សមរម្យសម្រាប់គម្រោងរយៈពេលវែង និងទ្រង់ទ្រាយធំ។ លក្ខណៈបច្ចេកទេសខ្នាតតូច និងតាមតម្រូវការមានភាពបត់បែនជាង ប៉ុន្តែមានតម្លៃខ្ពស់។

អនុសាសន៍សម្រាប់សេណារីយ៉ូកម្មវិធីទូទៅ

យោងតាមតម្រូវការជាក់លាក់នៃការពិសោធន៍ប្រភេទផ្សេងៗគ្នា បំពង់វប្បធម៌ដែលអាចចោលបានដូចខាងក្រោមត្រូវបានណែនាំសម្រាប់សេណារីយ៉ូកម្មវិធីទូទៅមួយចំនួន ដែលមានគោលបំណងបង្កើនប្រសិទ្ធភាព និងភាពជឿជាក់នៃការពិសោធន៍៖

១. ការដាំដុះកោសិកា

• ប្រភេទដែលបានណែនាំ: បំពង់​វប្បធម៌​ប៉ូលីភីលីន​មាប់មគ​ដែល​មាន​គម្រប​ប្រអប់​ព្រីន​ដែល​អាច​ដកដង្ហើម​បាន
• ហេតុផលសម្ភារៈប៉ូលីភីលីនមានភាពអសកម្មខាងគីមីល្អ និងភាពឆបគ្នាខាងជីវសាស្រ្ត សមស្របសម្រាប់សារធាតុរាវដាំដុះកោសិកា។ គម្របប្រអប់ព្រីនធឺរអាចសម្រេចបាននូវការផ្លាស់ប្តូរឧស្ម័នប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព ការពារការចម្លងរោគមីក្រូសរីរាង្គ និងបំពេញតាមបរិស្ថានឧស្ម័នដែលត្រូវការសម្រាប់ការរីកសាយកោសិកា។

2. ការសម្រេចបាននូវម៉ូលេគុល PCR/qPCR

• ប្រភេទដែលបានណែនាំ: បំពង់ PCR ឯកទេស ឬបំពង់មីក្រូសង់ទ្រីហ្វុយជ៍ ដែលគ្មាននុយក្លេអាស គ្មានពីរ៉ូហ្សែន
• ហេតុផលបំពង់ polypropylene ភាពបរិសុទ្ធខ្ពស់ បន្ទាប់ពីការព្យាបាលយ៉ាងតឹងរ៉ឹង អាចជៀសវាងការរិចរិលគំរូ ឬការបំពុលបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព ដើម្បីធានាបាននូវលទ្ធផលនៃការពង្រីកដែលមានភាពត្រឹមត្រូវ និងអាចទុកចិត្តបាន។ ការរចនាជញ្ជាំងស្តើងត្រូវបានណែនាំ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពនៃការផ្ទេរកំដៅ។

៣. ការផ្ទុកនៅសីតុណ្ហភាពទាប

• ប្រភេទដែលបានណែនាំបំពង់ប៉ូលីភីលីនធន់នឹងសីតុណ្ហភាពទាបជាមួយនឹងការរចនាប្រឆាំងនឹងការប្រេះស្រាំ និងគម្របវីសផ្សាភ្ជាប់
• ហេតុផលបំពង់ទាំងនេះអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីរក្សាទុកសំណាកក្នុងរយៈពេលយូរនៅសីតុណ្ហភាព -80°C ឬសូម្បីតែក្នុងអាសូតរាវ ហើយរចនាសម្ព័ន្ធពិសេសនេះការពារបំពង់ពីការប្រេះផុយ និងការលេចធ្លាយសំណាក។ ស័ក្តិសមសម្រាប់ការរក្សាទុកខ្សែកោសិកា សំណាកឈាម ប្រូតេអ៊ីន ឬអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីករយៈពេលវែង។

៤. ម៉ាស៊ីន​បង្វិល​

• ប្រភេទដែលបានណែនាំបំពង់ polypropylene ធន់ខ្ពស់ ការរចនាបាតមូល ឬរាងកោណ ជាមួយនឹងរ៉ូទ័រ centrifuge
• ហេតុផលបំពង់ PP មានភាពធន់នឹងកម្លាំងបង្វិលជុំល្អ ហើយអាចទប់ទល់នឹងកម្លាំងបង្វិលជុំខ្ពស់ដោយមិនខូចទ្រង់ទ្រាយ ឬបែក។ បាតរាងសាជីជួយប្រមូលកោសិកា ឬទឹកភ្លៀងនៅចំកណ្តាល និងបង្កើនអត្រានៃការងើបឡើងវិញ។

កំហុសទូទៅ និងវិធីដើម្បីជៀសវាងពួកវា

នៅក្នុងការអនុវត្តជាក់ស្តែង ការបរាជ័យក្នុងការពិសោធន៍ដោយសារតែការជ្រើសរើសបំពង់ដាំដុះមិនត្រឹមត្រូវកើតឡើងម្តងម្កាល។ កំហុសទូទៅមួយចំនួន និងការណែនាំសម្រាប់ដំណោះស្រាយដែលត្រូវគ្នាត្រូវបានរាយខាងក្រោមសម្រាប់ជាឯកសារយោងរបស់អ្នកស្រាវជ្រាវ៖

១. ការប្រើប្រាស់សម្ភារៈមិនធន់នឹងសីតុណ្ហភាពខ្ពស់សម្រាប់អូតូក្លាវីខុសបច្ចេកទេស